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对于严重少精子症、弱精子症、畸形精子症和抗精子抗体强阳性等患者，应用患者射出精液中的精子进行ICSI可获得70%左右的受精率。但对于梗阻性无精子症患者，必须应用外科手术方法方能获取精子。通常采用附睾取精术或睾丸取精术，附睾取精术具体方法包括：显微外科附睾精子抽吸术(MESA)和经皮附睾精子抽吸术(PESA)。睾丸取精术有两种方法：穿刺针吸取术（TESA）和睾丸组织活检术（testicular biopsy）。

1. 附睾取精术：
用于梗阻性无精子症等患者。

2. 睾丸取精术：
用于梗阻性无精子症或精子发生障碍等患者。